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        產(chǎn)品展示   ProductsATCC細胞>>轉(zhuǎn)化細胞>>前列腺上皮細胞;RWPE-1
         
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        產(chǎn)品名稱:
        前列腺上皮細胞;RWPE-1
        產(chǎn)品型號:
        產(chǎn)品報價:
        產(chǎn)品特點:
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          前列腺上皮細胞;RWPE-1的詳細資料:

        公司細胞廣泛用于國內(nèi)院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細介紹:

        產(chǎn)品名稱

        生長特性

        貨號

        前列腺上皮細胞;RWPE-1

        貼壁生長

        EY-X63649

        細胞名稱  前列腺上皮細胞;RWPE-1
        形態(tài)特性: 上皮細胞樣

        生長特性: 貼壁生長

        特征特性: 該細胞1996年由WebberMM建立。

        培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

        傳代方法: 1:3傳代,2-3天傳一代

        傳代情況: C5

        凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

        支原體檢測: 陰性
        ?
        冷凍保存細胞之方法
        冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
        冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
        實驗要點及說明:
        1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
        2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
        3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
        4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
        5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
        實驗報告:
        一、分離與培養(yǎng):
        1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
        2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
        3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
        4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
        5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
        二、免疫熒光鑒定:
        1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
        2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
        3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
        4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
        5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
        6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
        1-Methoxycarbonyl-β-carboline

        CAS No.:3464-66-2

        中文名:

        分子式:C13H10N2O2

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        CTBP2  C末端結(jié)合蛋白2抗體    現(xiàn)貨供應 0.1ml Lapatinib base

        PTGER1  前列腺素EP1受體抗體    現(xiàn)貨供應 0.1ml Levonorgestrel

        phosphoPLB/phospholamban(phospho Ser16+Thr17)  心臟蛋白抗體    現(xiàn)貨供應 0.1ml Levonorgestrel

        ASM/Acid sphingomyelinase  性神經(jīng)鞘脂酶抗體    現(xiàn)貨供應 0.1ml Levosulpiride

        IL1 Beta/IL1B  白介素1β抗體    現(xiàn)貨供應 0.1ml Levosulpiride

        BFAR/RNF47  環(huán)指蛋白47抗體    現(xiàn)貨供應 0.2ml Levothyroxine Sodium

        WISP1  Wnt1信號通路蛋白1抗體    現(xiàn)貨供應 0.2ml Lidocaine

        Annexin A8  膜粘連蛋白8抗體    現(xiàn)貨供應 0.1ml Lidocaine

        卡波樹脂  進口、國產(chǎn)  英文名稱:PolyacrylicresinⅢ  含量:AR,98%

        卡芥  進口、國產(chǎn)  英文名稱:BU  含量:親合層析純,1.95ug/ml

        卡爾費休試劑(含吡啶)  進口、國產(chǎn)  英文名稱:KarlFlscherreagent  含量:BR,94%

        卡拉膠類型III  進口、國產(chǎn)  英文名稱:KCarrageenanKarraType  含量:AR,98%

        卡拉膠類型V  進口、國產(chǎn)  英文名稱:ICarrageenanIOTAType  含量:BR,98%

        卡氏試液  進口、國產(chǎn)  英文名稱:KarlFlscherreagent  含量:CP,99%

        抗壞血  進口、國產(chǎn)  英文名稱:VC  含量:顯色劑,80%

         進口、國產(chǎn)  英文名稱:Zeocin  含量:USP級,900050mcg/mg

        抗痛素  進口、國產(chǎn)  英文名稱:Antipaindihydrochloride  含量:生物技術(shù)級,600u/mg

         進口、國產(chǎn)  英文名稱:Scandiumoxide  含量:BR,98%
        前列腺上皮細胞;RWPE-1標準II號營養(yǎng)瓊脂規(guī)格:250g用途:細菌計數(shù)、不含糖,可作血瓊脂基礎(chǔ)和傳代用

        *瓊脂培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于紡織品微真菌影響評價試驗

        沙氏瓊脂培養(yǎng)基規(guī)格:BR250g詳情介紹

        L-規(guī)格:10g用途:微生物指示劑

        麥康凱瓊脂(MAC)規(guī)格:250g用途:用于腸道致病菌的選擇性分離培養(yǎng)

        瓊脂培養(yǎng)基J規(guī)格:250g用途:用于沙門氏菌選擇性分離培養(yǎng)
        操作步驟:
        1、貼壁細胞的消化
        ①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
        ②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
        ③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
        化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
        ④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
        ⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
        2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

         

        產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 前列腺上皮細胞 RWPE-1
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