公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究，作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹：
產(chǎn)品名稱 | 生長(zhǎng)特性 | 貨號(hào) |
急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞；J-111 | 貼壁生長(zhǎng) | EY-X63462 |
細(xì)胞名稱 急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞；J-111
形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性:
培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
傳代方法:
傳代情況: 不詳
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 培養(yǎng)法（-）
?
冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
rmTrypsin 3, CF (10 UG)細(xì)胞
靛藍(lán)二磺酸鈉ATP2A1/SERCA1 (L24) Antibody羥基-甲酸
變色酸鈉,鉻變酸二鈉HMGCS1 (D1Q9D) Rabbit mAb氟-三氟酚
溴百里酚藍(lán)鈉鹽Phospho-Tie2 (Tyr992) Antibody衣康酸二甲酯
特地唑游離CDC37 (D28H7) Rabbit mAbN,N-二酰
水合;三Bcl-2 (D55G8) Rabbit mAb ( Specific)聚氧氫化
對(duì)二甲氨基甲 (DMAB)Bcl-2 (D55G8) Rabbit mAb ( Specific)2-基呋喃
特地唑;特地唑酸酯Tie2 (AB33) Mouse mAb硅藻土
酚紅鈉鹽Phospho-Tie2 (Ser1119) Antibody氧基椰油烷基
甲基-2-并噻唑酮腙鹽酸鹽，水合β-Amyloid (D54D2) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)N,N'-二甲基-1,2-環(huán)己二
赤蘚紅;赤蘚紅B鈉鹽Phospho-PI3 Kinase p85 (Tyr458)/p55 (Tyr199) Antibody順式-羥基-L-
達(dá)拉菲尼,達(dá)帕菲尼Phospho-PI3 Kinase p85 (Tyr458)/p55 (Tyr199) Antibody3,5-二溴甲酸
安賽蜜；AK糖Phospho-PI3 Kinase p85 (Tyr458)/p55 (Tyr199) Antibody甲酸甲酯
酰檸檬酸三丁酯NaPi2b/SLC34A2 (D6W2G) Rabbit mAbSOLUTOL HS 15
酰檸檬酸三酯Dexras1 Antibody2-溴-4'-酮
海藻酸nNOS (C7D7) Rabbit mAb對(duì)溴甲酸甲酯
棕櫚酸酯/L-抗壞血酸棕櫚酸酯EI24 (D3F6Z) Rabbit mAb*
阿斯巴甜Tri-Methyl-Histone H3 (Lys27) (C36B11) Rabbit mAb (Sepharose® Bead Conjuga)對(duì)甲酸甲酯
克拉維酸Fas (C18C12) Rabbit mAb肼基甲酸
刺槐素Fas (C18C12) Rabbit mAb對(duì)氧基甲酸
鹽酸安非他酮Receptor Tyrosine Kinase Antibody Sampler Kit基酚
左旋氨地平/磺酸左旋氨地平nNOS Antibody
左旋氨地平/磺酸左旋氨地平（標(biāo)準(zhǔn)品）NG2 Antibody三氟磺酸錫
曲尼司特nNOS (C12H1) Rabbit mAbDL-對(duì)
曲尼司特(標(biāo)準(zhǔn)品)Bcl10 (C78F1) Rabbit mAb1,3,5-*氧基
（標(biāo)準(zhǔn)品）STAG2 Antibody異酸間甲酯
CD27 (O323) Mouse mAb (APC Conjuga)羥基
D-Tom20 (D8T4N) Rabbit mAb羥基-甲氧基甲
依度沙班;伊多塞班TFEB Antibody縮二
牛防風(fēng)素;6-甲氧基當(dāng)歸素CHD3 Antibody肉桂酰
6-羥基(標(biāo)準(zhǔn)品)CHD3 Antibody肉桂酸
6-羥基Helios (D8W4X) XP® Rabbit mAb哌啶
甘氨石膽酸(GLCA)Helios (D8W4X) XP® Rabbit mAbN(α)-Z-D-2,二氨基酸
N-異基酰(含穩(wěn)定劑MEHQ)BCL6 Antibody三間基基膦
匹卡米隆Acetyl-Histone H3 (Lys56) Antibody1-(*基硅基)炔
雙酸鈉Acetyl-Histone H3 (Lys56) Antibody5-甲基異惡唑-甲
L-甘-谷二肽,甘氨酰-L-谷氨酰一水合物CHD4 Antibody氨基-氟酚 癌細(xì)胞；OS-RC-2 RPMI1640(w/oHepes)優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞；J-111人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白β(C/EBPβ)ELISA試劑盒MACELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA試劑盒M-AChRELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α(C/EBPα)ELISA試劑盒MAFELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白δ(C/EBPδ)ELISA試劑盒MAGEELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白ε(C/EBPε)ELISA試劑盒MAGELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人蛋白S(ProteinS)ELISA試劑盒mammarycarcinomaMarker-CA153ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人蛋白Z(ProteinZ)ELISA試劑盒MAOELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒MAP-2ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量 生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過(guò)細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái)，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
點(diǎn)擊放大
會(huì)員_a.png)