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        產(chǎn)品展示   ProductsATCC細(xì)胞>>轉(zhuǎn)化細(xì)胞>>張氏肝細(xì)胞;Changliver
         
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        產(chǎn)品名稱:
        張氏肝細(xì)胞;Changliver
        產(chǎn)品型號(hào):
        產(chǎn)品報(bào)價(jià):
        產(chǎn)品特點(diǎn):
        張氏肝細(xì)胞;Changliver相關(guān)產(chǎn)品:
        小鼠磷脂酶D2ELISA檢測試劑盒說明
        小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgAELISA檢測試劑盒費(fèi)用
        小鼠甲狀腺素抗體ELISA檢測試劑盒費(fèi)用
          張氏肝細(xì)胞;Changliver的詳細(xì)資料:

        公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:

        產(chǎn)品名稱

        生長特性

        貨號(hào)

        張氏肝細(xì)胞;Changliver

        貼壁生長

        EY-X63486

        細(xì)胞名稱  張氏肝細(xì)胞;Changliver
        形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣

        生長特性: 貼壁生長

        特征特性: 張氏肝細(xì)胞1954年從非惡性的人體組織中建立。廣泛應(yīng)用于病毒學(xué)、生化和惡性腫瘤相關(guān)的轉(zhuǎn)移研究。

        培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)胎牛血清,10%

        傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。

        傳代情況: PN5

        凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

        支原體檢測: 陰性
        ?
        冷凍保存細(xì)胞之方法
        冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
        冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
        實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
        1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
        2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
        3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 
        4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 
        5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
        實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
        一、分離與培養(yǎng):
        1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
        2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
        3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
        4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
        5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
        二、免疫熒光鑒定:
        1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
        2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
        3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
        4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
        5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
        6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
        rmIL-6, CF (5 UG)細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞; RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

        rmIL-6, CF (25 UG)細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞; RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

        rmIL-6 Ra, CF (25 UG)細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞;APOA1 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

        rmIL-6 Ra (25 UG)細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞;APOA5 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

        rmIL-6 (5 UG)細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞;ApoM RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

        rmIL-6 (25 UG)細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞;BCL-10 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

        rmIL-5, CF (5 UG)細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞;BLK RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

        rmIL-5, CF (25 UG)細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞;APP RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

        rmIL-5 (5 UG)細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞;AURKB RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

        rmIL-5 (25 UG)細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞;BRAF RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

        rmIL-4I1, CF (20 UG)細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞;BNP3 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

        rmIL-4, CF (50 UG)細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞;BTK RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

        rmIL-4, CF (10 UG)細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞;BNP1 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

        rmIL-4 Ra/Fc, CF (100 UG)細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞;BNP2 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

        rmIL-4 (50 UG)細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞;BSA RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

        rmIL-4 (10 UG)細(xì)胞名稱: 小鼠雜交瘤細(xì)胞;Calcyclin RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
        張氏肝細(xì)胞;Changliver人抗突變型瓜氨波形蛋白抗體(MCV)ELISA試劑盒MUC5ACELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

        人抗網(wǎng)硬蛋白抗體(ARA)ELISA試劑盒MUC5BELISAkit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

        人纖維介素蛋白(fgl2)ELISA試劑盒MVELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

        人抗載脂蛋白抗體A1(ApoA1)ELISA試劑盒MVIgGELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

        人冷球蛋白(CG)ELISA試劑盒MVIgMELISAkit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

        人硫肝素糖蛋白(HSPG)ELISA試劑盒MYO/MBELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

        人前白蛋白(PA)ELISA試劑盒MYO/MBELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

        人橋粒芯糖蛋白-1(Dsg-1)ELISA試劑盒MYO/MBELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
        操作步驟:
        1、貼壁細(xì)胞的消化
        ①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
        ②加入少量 生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
        ③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
        化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的  *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
        ④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
        ⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
        2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

         

        產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 張氏肝細(xì)胞 Changliver
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        021-69985169
        13611928337,15021460884

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