實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕； 
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率； 
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究，作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹：

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細胞名稱  胚胎干細胞；HES3.1
形態特性: 上皮細胞樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細胞屬保藏，其特征特性尚未公開。

培養條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

傳代方法: 1:3傳代，3-4天傳1次

傳代情況: C5

凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 陰性
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
化；或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來，吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養液，吹打下細胞，即可直接用于后續實驗。
④如果發現消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落， 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細胞，盡量去除細胞消化液后，加入含血清的*培養液重新懸浮細胞，即可用于后續實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
Koumine

CAS No.：1358-76-5

中文名：鉤吻素子

分子式：C20H22N2O

蘆薈苷 訂購|咨詢 　高鐵血紅蛋白還原酶(MHBR) 規格： 20mg

D()奎寧 訂購|咨詢 　高鐵血紅蛋白還原酶(MHBR) 規格： 20mg

甘松對照藥材 訂購|咨詢 　高鐵血紅蛋白還原酶(MHBR) 規格： 1g

薏苡仁對照藥材 訂購|咨詢 　高密度脂蛋白(HDL) 規格： 1g

野漆樹苷 訂購|咨詢 　高密度脂蛋白(HDL) 規格： 20mg

白當歸素 訂購|咨詢 　高密度脂蛋白(HDL) 規格： 10mg

吳茱萸 訂購|咨詢 　痙攣性截癱蛋白11(SPG11) 規格： 10mg

黃連 訂購|咨詢 　痙攣蛋白(SPAST) 規格： 20mg

擬人參皂苷RT5P 訂購|咨詢 　脊柱后側凸肽酶(KY) 規格： 20mg

白頭翁皂苷A3 訂購|咨詢 　脊椎蛋白1(SPON1) 規格： 20mg

紫花前胡苷 訂購|咨詢 　脊椎蛋白1(SPON1) 規格： 20mg

吳茱萸次 訂購|咨詢 　脊椎蛋白2(SPON2) 規格： 20mg

三尖杉寧 訂購|咨詢 　脊髓灰質炎病受體(PVR) 規格： 30mg

淡豆豉 訂購|咨詢 　脊髓灰質炎病受體相關分子1(PVRL1) 規格： 15g

細菌內素 訂購|咨詢 　脊髓灰質炎病受體相關分子4(PVRL4) 規格： 10000EU/支

槐花 訂購|咨詢 　凋亡抑制因子5(API5) 規格： 1g

三胞苷二 訂購|咨詢 　凋亡相關因子(FAS) 規格： 30mg/瓶

角鯊 訂購|咨詢 　凋亡相關因子(FAS) 規格： 0.5ml/支

γCatenin  γ連環素/連接蛋白γ抗體    現貨供應 0.2ml TetrahydroLBiopterin free base

Thrap3/TRAP150  甲狀腺激素受體相關蛋白3抗體    現貨供應 0.2ml Tirofiban HCl

PRMT5  組蛋白精甲基轉移酶5抗體    現貨供應 0.2ml Tirofiban HCl

ELL2  聚合酶延伸因子2抗體    現貨供應 0.2ml Pullulan

Escherichka coli K88K99/ETECK88  豬源產腸素性大腸桿菌K88K99抗體    現貨供應 0.2ml Vitamin E,dlαtocopherol

CSTF2T/CstF64  細胞分裂相關蛋白CSTF64抗體    現貨供應 0.2ml Stavudine

OGlAc transferase  O位N葡萄糖OGT抗體    現貨供應 0.2ml Stavudine

SAP62  剪接體相關蛋白62抗體    現貨供應 0.2ml Moclobemide

脫氫抗壞血  進口、國產  英文名稱:Dehydroascorbicacid  含量:CP，98.5%

脫碳秋水仙  進口、國產  英文名稱:Demecolcine  含量:超純，98%

脫瓜萎鐮菌  進口、國產  英文名稱:Deoxynivalenol  含量:BR，90%

脫核糖核苷′三  進口、國產  英文名稱:dNTPs  含量:高純，97%

脫核糖核緩沖液  進口、國產  英文名稱:DNABuffer  含量:高純，98%

脫腺苷單二  進口、國產  英文名稱:dAMP，2Na  含量:高純，98%

脫腺苷單  進口、國產  英文名稱:dAMP  含量:超純，98%

脫腺苷三三  進口、國產  英文名稱:dATP，3Na  含量:BR，98%

脫葉靈  進口、國產  英文名稱:TDZ  含量:高純，99%

妥布  進口、國產  英文名稱:Tobramycin  含量:BR，3000u/mg
人胚胎干細胞；HES3.1麥康凱瓊脂添加劑規格：1ml/支*5用途：每200ml HB0121培養基中添加1支(含0.01mg和亞碲鉀0.5mg) 配10盒

RS培養基規格：100g用途：用于致病性嗜水氣單胞菌的選擇性分離培養（GB標準）

BCYE-Cys瓊脂基礎規格：可溶性焦磷鐵用途：0.025g每支含量

含0.6%酵母浸膏的胰酪胨大豆瓊脂（TSA-YE）顆粒規格：250g用途：用于單增李氏菌的分純，培養，可用于做7%羊血瓊脂

蔗糖胰蛋白胨肉湯規格：250g用途：用于致病性嗜水氣單胞菌酶聯免疫試驗

刃天青規格：1g用途：微生物指示劑