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        產品展示   ProductsATCC細胞>>轉化細胞>>胚胎眼鞏膜成纖維細胞;HFSF
         
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        產品名稱:
        胚胎眼鞏膜成纖維細胞;HFSF
        產品型號:
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        產品特點:
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          胚胎眼鞏膜成纖維細胞;HFSF的詳細資料:

        實驗要點及說明:
        1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 
        2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 
        3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
        4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 
        5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
        公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:

        產品名稱

        生長特性

        貨號

        胚胎眼鞏膜成纖維細胞;HFSF

        貼壁生長

        EY-X63305

        ?
        細胞名稱  人胚胎眼鞏膜成纖維細胞;HFSF
        形態特性: 成纖維細胞樣

        生長特性: 貼壁生長

        特征特性: 北京眼科研究所建系。

        培養條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

        傳代方法: 1:2~1:3傳代;3~4天1次。

        傳代情況: P5

        凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS

        支原體檢測: 培養法(-)
        冷凍保存細胞之方法
        冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
        冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
        實驗報告:
        一、分離與培養:
        1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
        2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
        3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
        4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
        5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
        二、免疫熒光鑒定:
        1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
        2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
        3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
        4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
        5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
        6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
        操作步驟:
        1、貼壁細胞的消化
        ①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
        ②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
        ③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
        化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
        ④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
        ⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
        2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
        小鼠雜交瘤細胞;c7b8c1形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 半貼壁生長Anti-TNF alpha Monoclonal Antibody

        小鼠雜交瘤細胞;c7b8a5形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 半貼壁生長Anti-CPT2 Polyclonal Antibody

        小鼠雜交瘤細胞;c7b8b5形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 半貼壁生長Anti-HOXA1 Polyclonal Antibody

        小鼠雜交瘤細胞;c7b8F10形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 半貼壁生長Anti-BBC3 Polyclonal Antibody

        小鼠雜交瘤細胞;c7b8a8形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 半貼壁生長Anti-PDX1 Polyclonal Antibody

        小鼠雜交瘤細胞;c7b8H4形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 半貼壁生長Anti-MYC Polyclonal Antibody

        小鼠雜交瘤細胞;F6E4F8b2形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 半貼壁生長Anti-APITD1 Polyclonal Antibody

        小鼠雜交瘤細胞;D11E8A1H9形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 半貼壁生長Anti-CALB2 Polyclonal Antibody

        小鼠雜交瘤細胞;D11E8A1A4形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 半貼壁生長Anti-HSPA5 Polyclonal Antibody

        小鼠雜交瘤細胞;D11E8A1G10形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 半貼壁生長Anti-TP53 Polyclonal Antibody

        小鼠雜交瘤細胞;D11E8A1E6形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 半貼壁生長Anti-EpCAM Polyclonal Antibody

        小鼠雜交瘤細胞;D11E8A1F11形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 半貼壁生長Anti-TMEM173 Polyclonal Antibody

        雙位點HC-kit受體細胞株;DMF7形態特性: 圓形生長特性: 懸浮生長Anti-ADRM1 Polyclonal Antibody

        小鼠雜交瘤細胞;D11E8A1G5形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 半貼壁生長Anti-Acetyl-Histone H3-K18 Polyclonal Antibody

        PYTL基因小鼠支持細胞;15P-1形態特性: 生長特性: 貼壁生長Anti-AC1 Polyclonal Antibody

        腎癌細胞;769-P形態特性: 上皮細胞樣生長特性: 貼壁生長Anti-EGFL7 Polyclonal Antibody
        胚胎眼鞏膜成纖維細胞;HFSF大鼠細胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA試劑盒CSFELISAKit產品規格:48T/96T。

        大鼠細胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA試劑盒CT-1ELISAKit產品規格:48T/96T。

        大鼠細胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒CT-1ELISAKit產品規格:48T/96T。

        大鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒CT-1ELISAKit產品規格:48T/96T。

        大鼠熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒CTACKELISAKit產品規格:48T/96T。

        大鼠熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒CTAPⅢELISAKit產品規格:48T/96T。

        大鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒CTELISAKit產品規格:48T/96T。

        大鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒CTELISAKit產品規格:48T/96T。

        產品相關關鍵字: 胚胎眼鞏膜成 HFSF 纖維細胞
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        021-69985169
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