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        產品展示   ProductsATCC細胞>>轉化細胞>>小鼠胚胎干細胞;ES-D3(CRL-1934)
         
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        產品名稱:
        小鼠胚胎干細胞;ES-D3(CRL-1934)
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        產品特點:
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          小鼠胚胎干細胞;ES-D3(CRL-1934)的詳細資料:

        實驗要點及說明:
        1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 
        2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 
        3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
        4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 
        5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
        公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:

        產品名稱

        生長特性

        貨號

        小鼠胚胎干細胞;ES-D3(CRL-1934)

        貼壁生長

        EY-X63507

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        細胞名稱  小鼠胚胎干細胞;ES-D3(CRL-1934)
        形態特性: 球形

        生長特性: 貼壁生長

        特征特性: 小鼠胚胎干細胞;在缺乏滋養層或條件培養基時,這株細胞自發分化成胚胎結構。它們可以注射回胚泡并參與形成生殖系。未分化細胞可以通過基因靶向技術進行基因改良。貼壁生長;形成球形。

        培養條件: 干細胞培養基

        傳代方法:

        傳代情況: PN

        凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS

        支原體檢測: 陰性
        冷凍保存細胞之方法
        冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
        冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
        實驗報告:
        一、分離與培養:
        1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
        2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
        3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
        4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
        5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
        二、免疫熒光鑒定:
        1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
        2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
        3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
        4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
        5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
        6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
        操作步驟:
        1、貼壁細胞的消化
        ①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
        ②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
        ③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變
        化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
        ④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
        ⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落, 直接用細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
        2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
        rmDLL4, CF (50 UG)細胞名稱: 棕果蝠肺成纖維細胞;FFBL3 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS

        rmDLL4 (50 UG)細胞名稱: 棕果蝠皮膚成纖維細胞;FFBS3 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS

        rmDLL1/Fc, CF (50 UG)細胞名稱: 人胚胎皮膚成纖維細胞;HES DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS

        rmDkk-4, CF (10 UG)細胞名稱: 人皮膚成纖維細胞;HSAS4 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS

        rmDkk-4 (10 UG)細胞名稱: 人肺癌細胞;A549[A-549] RPMI1640(w/oHepes)15%NBS

        rmDkk-2, CF (10 UG)細胞名稱: 恒河猴肺細胞;RM-L1 McCoy's5AMedia(ModifiedwithTricine)15%NBS

        rmDkk-2 (10 UG)細胞名稱: 大長舌果蝠肺細胞;DBL1 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS

        rmDkk-1, CF (10 UG)細胞名稱: 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS

        rmDkk-1 (His-tag), CF (10 UG)細胞名稱: 小鼠胚胎細胞;BABL/C-E M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS

        rmDkk-1 (His-tag) (10 UG)細胞名稱: 大長舌果蝠肌肉細胞;DBM1 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS

        rmDkk-1 (10 UG)細胞名稱: 豚鼠肺細胞;GP-F1 M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS

        rmDhh-N, CF (50 UG)細胞名稱: 豚鼠皮膚細胞;GP-S1 M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS

        rmDermatopontin, CF細胞名稱: 豚鼠皮膚細胞;GP-S2 M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS

        rmDectin-2a, CF (50 UG)細胞名稱: 小鼠肺成纖維細胞;WML2 RPMI1640(w/oHepes)15%NBS

        rmDectin-1,CF (50 UG)細胞名稱: 豚鼠心肌細胞;GP-H1 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS

        rmDecorin, CF (100 UG)細胞名稱: 豚鼠皮膚細胞;GP-S3 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS
        小鼠胚胎干細胞;ES-D3(CRL-1934)人血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒PⅢNPELISAKit產品規格:48T/96T。

        人血小板反應蛋白/敏感蛋白1(TSP-1)ELISA試劑盒PⅢNPELISAKit產品規格:48T/96T。

        人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒PⅢNPELISAKit產品規格:48T/96T。

        人纖溶抑制因子/激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒PⅢNPELISAKit產品規格:48T/96T。

        11去氫血栓B2(11-DH-TXB2)ELISA試劑盒PⅢNPELISAKit產品規格:48T/96T。

        2,3Dinor血栓B2(2,3-dinor-TXB2)ELISA試劑盒PⅢNTELISAKit產品規格:48T/96T。

        人溶血補體(Hc)ELISA試劑盒PⅢNTELISAKit產品規格:48T/96T。

        人血栓調節蛋白復合物(T-TM)ELISA試劑盒PⅢNTELISAKit產品規格:48T/96T。

        產品相關關鍵字: 小鼠胚胎干細胞 ES-D3(CRL-1934)
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        021-69985169
        13611928337,15021460884

        環保在線

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