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        產品展示   ProductsATCC細胞>>轉化細胞>>骨肉瘤細胞;U2OSE6Tet6
         
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        產品名稱:
        骨肉瘤細胞;U2OSE6Tet6
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          骨肉瘤細胞;U2OSE6Tet6的詳細資料:

        公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:

        產品名稱

        生長特性

        貨號

        骨肉瘤細胞;U2OSE6Tet6

        貼壁生長

        EY-X63998

        細胞名稱  骨肉瘤細胞;U2OSE6Tet6
        形態(tài)特性: 上皮細胞樣

        生長特性: 貼壁生長

        特征特性: 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。

        培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

        傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次

        傳代情況: C5

        凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

        支原體檢測: 陰性
        ?
        冷凍保存細胞之方法
        冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
        冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
        實驗要點及說明:
        1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
        2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 
        3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
        4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
        5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
        實驗報告:
        一、分離與培養(yǎng):
        1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
        2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
        3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
        4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
        5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
        二、免疫熒光鑒定:
        1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
        2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
        3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
        4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
        5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
        6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
        腫廇蛋白P63檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: F12K胎牛血清,10%Recombinant Tumor Protein

        可溶性半乳糖凝集素3結合蛋白檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)胎牛血清,10%Lectin Galactoside Binding, Soluble 3 Binding Protein

        皰疹病-6型感染IgG抗體檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)胎牛血清,10%herpes virus-6 IgG Antibody

        谷氨-天冬氨轉運體檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)胎牛血清,10%Glutamate aspartate transporter

        白喉IgG抗體檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)胎牛血清,10%diphtheria IgG

        NeuroD1檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)胎牛血清,10%NeuroD1

        血清蛋白檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)胎牛血清,10%Serum albumin

        過氧化還原酶1檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)胎牛血清,10%Oxidoreductase

        明膠酶A檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)胎牛血清,10%GelatinaseA

        維生素B檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)優(yōu)質胎牛血清,10%Vitamin B

        兒茶酚胺氧位轉移酶抗體檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)胎牛血清,10%catechol-O-transferase antibody

        Ub檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)胎牛血清,10%Perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibody

        肽基脯氨酰異構酶A檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)胎牛血清,10%Peptidyl proplyl Isomerase A

        白細胞介素17E檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBSInterleukin 17E

        促胰島生長素檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)胎牛血清,20%betatrophin

        β細胞素檢測試劑盒生長特性: 貼壁生長培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)胎牛血清,10%Betacellulin

        2,3-二磷甘油檢測試劑盒生長特性: 懸浮生長培養(yǎng)條件: IMDM:Iscove'sModiefiedDulbecco'sMedium優(yōu)質胎牛血清,20%2,3-diphosphonooxypropanoic acid
        骨肉瘤細胞;U2OSE6Tet6靛藍482-89-3中文別名:靛蘭,還原藍  

        英文名:Indigo  

        CAS登錄號:482-89-3

        分子式:C16H10O2N2

        分子量:262.26

        分子結構:

        外觀:藍色粉末

        規(guī)格:20mg/支

        純度:≥ 98%

        用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。

        提取來源:靛藍。

        溶解性:微溶于水、乙醇、甘油和丙二醇,不溶于油脂。

        熔點:390-392℃

        藥理藥效:用于食品、醫(yī)藥和日用化妝品的著色。食用靛藍為食用合成色素。

        貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光

        有效期: 2年
        操作步驟:
        1、貼壁細胞的消化
        ①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
        ②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
        ③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
        化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
        ④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
        ⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
        2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

         

        產品相關關鍵字: 骨肉瘤細胞 U2OSE6Tet6
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        13611928337,15021460884

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