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        產(chǎn)品展示   ProductsATCC細(xì)胞>>轉(zhuǎn)化細(xì)胞>>小鼠黑色素瘤細(xì)胞;B16-F1
         
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        產(chǎn)品名稱:
        小鼠黑色素瘤細(xì)胞;B16-F1
        產(chǎn)品型號:
        產(chǎn)品報價:
        產(chǎn)品特點:
        小鼠黑色素瘤細(xì)胞;B16-F1相關(guān)產(chǎn)品:
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        U-2 OS人骨肉瘤細(xì)胞
        MC3T3-E1小鼠胚胎成骨細(xì)胞前體細(xì)胞
          小鼠黑色素瘤細(xì)胞;B16-F1的詳細(xì)資料:

        公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:

        產(chǎn)品名稱

        生長特性

        貨號

        小鼠黑色素瘤細(xì)胞;B16-F1

        貼壁生長

        EY-X63606

        細(xì)胞名稱  小鼠黑色素瘤細(xì)胞;B16-F1
        形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣

        生長特性: 貼壁生長

        特征特性: B16-F1是B16-F0的亞系。

        培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

        傳代方法: 1:3傳代,2-3天傳一代

        傳代情況: C27

        凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

        支原體檢測: 陰性
        ?
        冷凍保存細(xì)胞之方法
        冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
        冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
        實驗要點及說明:
        1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
        2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
        3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
        4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
        5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
        實驗報告:
        一、分離與培養(yǎng):
        1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
        2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
        3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
        4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
        5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
        二、免疫熒光鑒定:
        1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
        2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
        3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
        4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
        5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
        6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
        Rhynchosporium secalis (Oudemans) Davis, an ..細(xì)胞名稱: 紅色熒光蛋白和螢光素酶標(biāo)記的人肝膽管癌細(xì)胞;RBE-Luc2-tdT RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;

        Arthrobacter histidinolovorans Adams細(xì)胞名稱: 紅色熒光蛋白和螢光素酶標(biāo)記的人肝癌細(xì)胞;Huh7-mCas9-Luc2-tdT DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS;

        Fusarium oxysporum f. sp.phaseoli Kendri ..細(xì)胞名稱: 紅色熒光蛋白和螢光素酶標(biāo)記的人肝癌細(xì)胞;SK-HEP-1-Cas9-Luc2-tdT MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

        Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細(xì)胞名稱: 紅色熒光蛋白標(biāo)記的人肝癌細(xì)胞;Huh7-mCas9-mCherry DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS;

        Rhynchosporium secalis (Oudemans) Davis, an ..細(xì)胞名稱: 紅色熒光蛋白標(biāo)記的人肝癌細(xì)胞;PLC/PRF/5-Cas9-mCherry MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

        Fusarium oxysporum f. sp.tuberosi Snyder ..細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞株;8B5D4 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

        Staphylococcus xylosus Schleifer and Kloos細(xì)胞名稱: 紅色熒光蛋白和螢光素酶標(biāo)記的人肝癌細(xì)胞;PLC/PRF/5-Cas9-Luc2-tdT MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

        Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞株;8B3G11 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

        Salmonella enterica subsp.enterica (e ..細(xì)胞名稱: 人彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤;CYP6 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

        Aeromonas salmonicida (Lehmann and Neumann) ..細(xì)胞名稱: 紅色熒光蛋白標(biāo)記的人肝腹水腺癌細(xì)胞;SK-HEP-1-Cas9-mCherry MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

        freeze-dried細(xì)胞名稱: 人彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞系;CYP6D MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

        freeze-dried細(xì)胞名稱: 犬腎細(xì)胞;MDCK-G1 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

        Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..細(xì)胞名稱: 中國人肺腺癌細(xì)胞系;CAFQ1 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

        Hypocrea lacuwombatensis細(xì)胞名稱: 人胚胎腎細(xì)胞;HEK293-EDAR-His4 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

        Mus musculus (B cell); Mus musculus (myeloma ..細(xì)胞名稱: 雜交瘤細(xì)胞株;10A4 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

        frozen細(xì)胞名稱: 耐克唑替尼人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株;H3122-CR23 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
        小鼠黑色素瘤細(xì)胞;B16-F1人組織因子(TF)ELISA試劑盒VD3ELISAkit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

        C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒VDELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

        Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)ELISA試劑盒VDELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

        人血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒VDELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

        人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒VDELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

        人血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒VDRELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

        人血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒VE-cadELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

        人血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒VE-cadELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
        操作步驟:
        1、貼壁細(xì)胞的消化
        ①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
        ②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時間有所不同。
        ③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
        化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的  *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
        ④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
        ⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實驗。
        2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

         

        產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 小鼠黑色素瘤細(xì)胞 B16-F1
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        021-69985169
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