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        產品展示   ProductsATCC細胞>>轉化細胞>>小鼠胚胎成纖維細胞;NIH/3T3
         
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        產品名稱:
        小鼠胚胎成纖維細胞;NIH/3T3
        產品型號:
        產品報價:
        產品特點:
        小鼠胚胎成纖維細胞;NIH/3T3相關產品:酯(標準品)1,3,5,7-四甲基-1,3,5,7-四乙烯基環四硅氧烷1,3,5-三噁烷
        (標準品)1,3,5-三氧雜環己烷1,3-二氨基-2-羥基烷
        (標準品)1,3-二烷1,3-二硫雜環己烷
        (標準品)1,3-二羥基烷1,3-二羥基丁烷
          小鼠胚胎成纖維細胞;NIH/3T3的詳細資料:

        我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌;部分產品現貨,超低比價,產品名稱貨期短,價格優,售后齊全。

        產品名稱

        小鼠胚胎成纖維細胞;NIH/3T3

        生長特性

        貼壁生長

        貨號

        EY-X63225

        細胞名稱  小鼠胚胎成纖維細胞;NIH/3T3
        形態特性: 成纖維細胞樣

        生長特性: 貼壁生長

        特征特性: NIH/3T3是從NIHSwiss小鼠胚胎培養物中建立的高度接觸性抑制的連續傳代細胞株。為了培育在形態學特征上更適合于進行轉化分析的亞株,建立的NIH/3T3細胞株又進行了5輪以上亞。該細胞株對肉瘤病毒的轉化灶形成和白血病病毒的繁殖高度敏感,對DNA轉化及轉染研究十分有用。鼠痘病毒陰性。

        培養條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%小牛血清

        傳代方法: 當細胞生長至80%或80%以下匯合時即可傳代,切勿達到匯合;1:3~1:6傳代,每周2次。

        傳代情況: C5

        凍存條件: 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS

        支原體檢測: 培養法(-)
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        產品特點:
        1、 使用方便:不需昂貴設備。
        2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
        3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
        4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
        5、 含蛋白穩定劑,提取的蛋白穩定。
        6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
        7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
        8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。 
        培養操作步驟
        1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 
        2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片); 
        3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時; 
        4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中; 
        5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時,將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 
        實驗要點及說明:
        1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 
        2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 
        3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
        4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 
        5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
        操作流程:
        1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
        1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
        1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
        1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
        1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
        1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
        1.5 細胞的貼壁率 指數生的細胞,以0.25%消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ,計算貼壁率。
        1.6 生長曲線 取指數生的細胞用消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。
        SV40T轉化的人胚腎細胞(亞系);293T/17形態特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Human TRANCE ELISA KIT

        人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞;C918形態特性: 多角生長特性: 貼壁生長Human PDK ELISA KIT

        小鼠T淋巴細胞;Cl.Ly1+2-/9形態特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Mouse Cystatin C ELISA KIT

        人髓母細胞瘤細胞;Daoy形態特性: 多角生長特性: 貼壁生長Human IL-34 ELISA KIT

        人導管癌細胞;HCC38形態特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Human M-CSF ELISA KIT

        大鼠胚胎心肌細胞;H9c2(2-1)形態特性: 成肌細胞樣生長特性: 貼壁生長Chicken IL-2 ELISA Kit

        大鼠骨髓瘤細胞;IR983F形態特性: 圓形生長特性: 懸浮生長Human IL-19 ELISA KIT

        小鼠腎集合管細胞(SV40轉化);M-1形態特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Mouse CXCL12 ELISA KIT

        小鼠單核巨噬細胞;J774A.1形態特性: 單核細胞/巨噬細胞樣生長特性: 貼壁生長Human ACE ELISA KIT

        人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞;M619形態特性: 多角生長特性: 貼壁生長Human MMP-2 ELISA KIT

        狗腎細胞隆突型;MDCKsuperdome形態特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Bovine 14-3-3 eta ELISA Kit

        大鼠氣管上皮細胞;RTE形態特性: 多角生長特性: 貼壁生長Human CD23 ELISA KIT

        綠色熒光蛋白標記小鼠前胃癌細胞;MFC-GFP形態特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Mouse Galectin-3 ELISA KIT

        人胃癌細胞;MGC-803形態特性: 上皮樣生長特性: 貼壁生長Human GDF-15 ELISA KIT

        綠色熒光蛋白標記人細胞;HeLa-GFP形態特性: 上皮樣;多角生長特性: 貼壁生長Human CCL5 ELISA KIT

        人胃癌細胞;MKN-45形態特性: 圓形生長特性: 貼壁生長Mouse Renin-1 ELISA KIT
        小鼠胚胎成纖維細胞;NIH/3T3小鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISA試劑盒ACPELISAKit產品規格:48T/96T。

        小鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISA試劑盒AcSDKPELISAKit產品規格:48T/96T。

        小鼠促腎上皮質激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒AcSDKPELISAKit產品規格:48T/96T。

        小鼠促甲狀腺素釋放激素(TRH)ELISA試劑盒AcSDKPELISAKit產品規格:48T/96T。

        小鼠抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒ACTHELISAKit產品規格:48T/96T。

        小鼠釋放激素(GnRH)ELISA試劑盒ACTHELISAKit產品規格:48T/96T。

        小鼠血栓前體蛋白(TpP)ELISA試劑盒ACTHELISAKit產品規格:48T/96T。

        小鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒ACTHELISAKit產品規格:48T/96T。

        產品相關關鍵字: 小鼠胚胎成纖維細胞 NIH/3T3
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        021-69985169
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