在現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷中，細(xì)胞因子的定量檢測(cè)對(duì)于理解免疫反應(yīng)、炎癥機(jī)制及疾病進(jìn)程具有重要意義。其中，白介素-1β（Interleukin-1 beta,IL-1β）作為一種關(guān)鍵的促炎性細(xì)胞因子，在感染、自身免疫性疾病、神經(jīng)退行性疾病、代謝綜合征及腫瘤發(fā)生發(fā)展中扮演著核心角色。為實(shí)現(xiàn)對(duì)IL-1β的高靈敏度、高特異性定量分析，白介素1βElisa試劑盒已成為科研實(shí)驗(yàn)室、醫(yī)院檢驗(yàn)科和藥物研發(fā)機(jī)構(gòu)標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)工具。

一、白介素-1β的生物學(xué)功能與臨床意義

白介素1βElisa試劑盒是由單核/巨噬細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞等免疫細(xì)胞在受到病原體相關(guān)分子模式（PAMPs）或損傷相關(guān)分子模式（DAMPs）刺激后，經(jīng)NLRP3炎癥小體激活而分泌的一種強(qiáng)效炎癥介質(zhì)。其主要生物學(xué)功能包括：誘導(dǎo)發(fā)熱、急性期蛋白合成；促進(jìn)T細(xì)胞活化與分化；增強(qiáng)內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子表達(dá)，介導(dǎo)白細(xì)胞遷移；刺激成纖維細(xì)胞增殖與骨吸收，參與關(guān)節(jié)炎等組織損傷。

IL-1β水平異常升高與多種疾病密切相關(guān)，如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)、2型糖尿病、阿爾茨海默病、動(dòng)脈粥樣硬化及膿毒癥等。因此，準(zhǔn)確測(cè)定體液中的IL-1β濃度，不僅有助于揭示疾病機(jī)制，還可作為療效評(píng)估和預(yù)后判斷的生物標(biāo)志物。

二、ELISA技術(shù)原理與試劑盒構(gòu)成

ELISA（酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定）是一種基于抗原-抗體特異性結(jié)合的固相免疫分析技術(shù)。白介素-1βELISA試劑盒通常采用雙抗體夾心法（Sandwich ELISA），其基本原理如下：

1.在微孔板預(yù)包被一種針對(duì)IL-1β的捕獲抗體；

2.加入含待測(cè)IL-1β的樣本（血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等），IL-1β與固相抗體結(jié)合；

3.洗滌后加入標(biāo)記的檢測(cè)抗體，與已固定的IL-1β形成“夾心”復(fù)合物；

4.再加入鏈霉親和素-辣根過(guò)氧化物酶（SA-HRP）；

5.加入顯色底物（如TMB），HRP催化底物產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物；

6.終止液終止反應(yīng)后，溶液變?yōu)辄S色；

7.使用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本中IL-1β的濃度。

一套完整的IL-1βELISA試劑盒通常包含：

預(yù)包被抗體的96孔微孔板（可拆條）；

標(biāo)準(zhǔn)品（凍干或液體，需梯度稀釋）；

酶結(jié)合物（SA-HRP）；

樣本稀釋液、洗滌液、顯色液、終止液；

密封膜、說(shuō)明書(shū)等。

三、核心技術(shù)參數(shù)與性能指標(biāo)：

檢測(cè)范圍廣：通常為15.6–1000 pg/mL，部分高靈敏度試劑盒可達(dá)3.9–250 pg/mL；

高靈敏度：檢測(cè)限（Sensitivity）可低至1–5 pg/mL；

高特異性：不與IL-1α、IL-1ra或其他細(xì)胞因子交叉反應(yīng)；

重復(fù)性好：批內(nèi)變異系數(shù)（CV%）<10%，批間CV%<15%；

回收率高：80%–120%，表明基質(zhì)干擾小；

線性良好：樣品稀釋后檢測(cè)值與理論值接近。

四、操作流程與注意事項(xiàng)

典型操作步驟（以96孔板為例）：

1.將標(biāo)準(zhǔn)品和樣本加入相應(yīng)孔中，37℃孵育1–2小時(shí)；

2.洗滌5次，去除未結(jié)合物質(zhì)；

3.加入化抗體，37℃孵育1小時(shí)；

4.洗滌后加入酶結(jié)合物，37℃孵育30–60分鐘；

5.再次洗滌，加入TMB顯色液，避光顯色15–30分鐘；

6.加入終止液，立即在450nm讀數(shù)。

白介素1βElisa試劑盒不僅是實(shí)驗(yàn)室的“數(shù)據(jù)生成器”，更是連接基礎(chǔ)研究與臨床轉(zhuǎn)化的橋梁。它以高精度、高可靠性為免疫學(xué)、炎癥學(xué)和疾病機(jī)制研究提供了堅(jiān)實(shí)的數(shù)據(jù)支撐。隨著精準(zhǔn)醫(yī)療和個(gè)體化治療的發(fā)展，IL-1β等細(xì)胞因子的定量檢測(cè)將在疾病預(yù)警、分型與治療監(jiān)測(cè)中發(fā)揮越來(lái)越重要的作用。 上一篇 豚鼠白細(xì)胞介素13酶聯(lián)免疫試劑盒洗滌方法 下一篇 家蠶卵黃蛋白（LT）elisa試劑盒樣本處理及要求